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基因芯片

日期:2018-07-05

基因芯片采用大量特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于与光电测量装置相结合的硅片、玻璃片、塑料片或尼龙基底等固体支持物上,形成二维阵列,与待测的标记样品的基因按碱基对配对原理进行杂交,从而检测特定基因。

基因芯片的工作原理:

基因芯片技术的研究过程,包括以下四个基本步骤:

  1. DNA探针的大量收集和纯化,基因芯片探针制备方法可以根据基因设计特异性的PCR引物,对基因片段进行特异性地扩增,也可以建立均一化的cDNA文库,通过克隆鉴定、筛选、扩增产物;

    2) 将纯化后的探针固定在片基上,首先要将基片(主要用的是玻璃片)进行特殊的化学处理, 使玻璃片醛基化或氨基化, 然后将纯化的探针通过显微打印或喷打在基片上, 再将打印好的玻璃片进行后处理,如水合化、加热或紫外交联等;

    3) 样品的标记,标记的方法一般是采用逆转录法或随机引物延伸法等;

    4) 杂交后芯片的扫描、图像的采集和数据分析。

基因芯片的分类:

基因芯片的原理并不复杂, 但其类型较为繁多, 可以依据不同的分类方法进行分类,一般可分为以下几种:

1) 按照载体上所添加DNA 种类的不同,基因芯片可分为寡核苷酸芯片和cDNA 芯片两种;

2) 按照载体材料分类,可分为无机材料和有机材料两种;

3) 按照点样方式分类,分为原位合成芯片、微矩阵芯片、电定位芯片三种;

4) 按照基因芯片的用途分类,可以分为基因表达芯片和DNA测序芯片两种。

基因芯片的应用:

1) 基因表达检测

2) 寻找新基因

3) 突变体和多态性的检测

4) 传染性病原体的检测

5) 遗传病的诊断

6) 在环境科学和食品卫生领域上的应用


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