实时荧光定量PCR 实验无CT 值出现或无扩增信号

实验的循环数不够

设置的循环数应该在35 以上，最多可增加至45 个循环

通道选择不正确

根据说明书的要求选择采光通道

荧光采集位置设置有误

根据说明书的要求设置荧光信号采集位置

引物保存方式不恰当

向经销商申请重新发送引物探针验证

模板量不足

增大模板的加入量

模板降解

优化RNA提取方法/使用RNA提取试剂盒

加入样品中存在PCR 抑制物

提高样本纯度，排除干扰

PCR 仪器故障

联系仪器工程师排除

实验中出现阴性抬头及其解决方案

实验室气溶胶污染

在实验操作过程中严防气溶胶的产生

标本交叉污染

规范实验操作

移液器使用引起的交叉污染

通过使用带滤芯吸头和规范移液器使用方法

实验结果重复性差

实验操作过程中加样不准确

加大试剂配置体系

有液体吸附在管壁上

加样完成后瞬时离心

荧光定量PCR 仪孔间温度不一致或孔间升降温不一致

更换荧光定量PCR仪

模板浓度过低

提高模板浓度